線粒體是�(xì)胞的能量工廠,其功能還涉及細(xì)胞代�、信號傳�(dǎo)、分�、生�、凋亡和死亡等多�(gè)重要生理過程。線粒體自噬(mitophagy)是細(xì)胞清除損傷或衰老的線粒�,并循環(huán)利用其組成元素的過程,因此線粒體自噬的研究具有重要意�。目�,對線粒體自噬的研究主要采用抗體或熒光蛋白標(biāo)記法,或線粒體熒光探針和溶酶體熒光探針組合使用共同檢�。但前者操作復(fù)雜,在活�(xì)胞中�(yīng)用受到限�;而后者特異性較低�
�pH敏感的探針分�HQO無需與其它探針分子組合使�,其�(jìn)入活�(xì)胞后選擇性富集于線粒�;當(dāng)線粒體發(fā)生自噬形成自噬溶酶體后其微環(huán)�pH下降,導(dǎo)�HQO�(zhì)子化;質(zhì)子化�HQO的熒光激�(fā)和發(fā)射波長均�(fā)生紅移(斯托克斯位移大于100 nm�。由于微�(huán)�pH值的不同,使�HQO在線粒體和自噬溶酶體中呈�(xiàn)不同顏色的熒�,因而可以很好地區(qū)分正常線粒體和包被損傷線粒體的自噬溶酶體�HQO分子可精確定位線粒體,準(zhǔn)確示蹤線粒體自噬過程;該探針分子將為線粒體代謝過程提供新的研究方�,也為篩選線粒體自噬抑制劑或促�(jìn)劑提供有效的工具�
HQO具有兩�(gè)激�(fā)與相�(yīng)�(fā)射波長,一�(gè)示蹤線粒�,一�(gè)示蹤自噬溶酶體,通過兩�(gè)波長的變化來闡述自噬流程。和已有常規(guī)自噬檢測方法相比,它具有如下�(yōu)勢:①樣品制備簡�;②操作步驟�;③特異性指示線粒體被噬到自噬溶酶體形成的過�,且能特異性指示局部線粒體的被�;④所需相應(yīng)耗材及工具較��[1]

圖一:探�HQO�HQO示蹤活細(xì)胞線粒體自噬過程原理�
�(chǎn)品編�
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�(chǎn)�名稱
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簡稱
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CAS
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�(jié)�(gòu)�
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2668725
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2,6-雙(2-�3,3-二甲�-1-丙基 - 二氫吲哚-2-亞基)亞乙基� - �(huán)己酮
2,6-Bi(2-(3,3-dimethyl-1-propylindolin-2-ylidene)ethylidene)-cyclohexanone
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HQO
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1442645-34-2
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�(chǎn)品使用說明:
1、細(xì)胞的培養(yǎng),將�(xì)胞種植于共聚焦培�(yǎng)皿中,根�(jù)不同�(shí)�(yàn)需要種植相�(yīng)�(xì)胞密度及培養(yǎng)相應(yīng)�(shí)��
2、誘�(dǎo)自噬、細(xì)胞染色和共聚焦成�。適�(dāng)條件誘導(dǎo)自噬(如無血清培�(yǎng)��PBS或者細(xì)胞自噬激活劑處理等)�HQO�10 μM)于無血清培�(yǎng)基中加入培養(yǎng)皿中37℃孵�10 min�PBS洗滌一到三�,共聚焦成像�559 nm激�(fā)�570-610 nm�(fā)射波長為示蹤正常線粒體的熒光�635 nm激�(fā)�650-730 nm�(fā)射波長為示蹤自噬溶酶體的熒光�
更多熒光探針�(chǎn)�
�(chǎn)品編�
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�(chǎn)�名稱
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CAS
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�(jié)�(gòu)�
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2668724
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2,9-�[4-�4-甲基哌嗪-1-基)苯乙烯基]-1,10 - 菲咯�
2,9-Bis[4-(4-methylpi-perazin-1-yl)styryl]-1,10-phenanthroline
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1792998-33-4
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2668726
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N-己酸�-4H-1,2,4-三氮�(1,5-a)二氮雜環(huán)-1,8-萘酰亞胺
3,9-Dihydro-1,3-dioxopyrido[3,4,5-gh][1,2,4]triazolo[1,5-a]perimidine-2(1h)-hexanoic acid
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1359819-97
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2668727
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CSTS
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N/A
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.jpg)
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433521
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D-熒光素鉀�
D-Luciferin potassium salt
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115144-35-9
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.jpg)
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102273
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2,3-二氨基萘
2,3-Diaminonaphthalene
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771-97-1
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2668723
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9-甲基-3,6-�[5-�4-甲基哌嗪-1-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-�] -9H-咔唑
9-Methyl-3,6-bis[5-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzo[d]imidazol-2-yl]-9H-carbazole
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1514901-89-3
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227585
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鄰苯二甲�
o-Phthalaldehyde
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643-79-8
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相關(guān)文獻(xiàn)
[1] Ying Liu, Jin Zhou, Linlin Wang, Xiaoxiao Hu, Xiangjun Liu, Meirong Liu, Zehui Cao, Dihua Shangguan and Weihong Tan. A Cyanine Dye to Probe Mitophagy: Simultaneous Detection of Mitochondria and Autolysosomes in Live Cells, J. Am. Chem. Soc., 2016, 138 (38), pp 12368–12374, DOI: 10.1021/jacs.6b04048�
� 其他配套�(chǎn)��