【產(chǎn)品編號�2793950
【英文名稱�Locus-specific, quantitative 5fC analysis Kit
【中文名稱�特定位點5-醛基胞嘧啶定量檢測試劑盒
【產(chǎn)品內(nèi)容�
�(chǎn)品組�
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含量
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溶液L1�Buffer L1�
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2.4 mL
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M
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24�
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模式序列
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24ul
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注:溶液L1:丙二腈反應液;M:丙二腈
【保存條件�模式序列置于-20 °C,可保存12個月�
M和溶�L1置于4 °C,可保存12個月�
M需避光保存�
【產(chǎn)品概述�
5-甲基胞嘧啶修飾(5mC)是真核細胞基因組中最為重要的表觀遺傳修飾之一�5mC可以�TET家族酶的作用下逐步氧化生成5-羥甲基胞嘧啶�5hmC��5-醛基胞嘧啶(5fC)和5-羧基胞嘧啶(5caC�;對于上述幾種新�DNA修飾的功能研究是目前核酸表觀遺傳學的一個研究熱��
百靈威推出新�5fC檢測試劑�,它主要用于5-醛基胞嘧啶(5-formylcytosine, 5fC)的全基因組單堿基分辨率測序;也可應用于5fC在生物發(fā)育和疾病�(fā)生發(fā)展過程的生物學功能研��
【自備材料�
• Oligo Clean & Concentrator (ZYMO, #D4060)
• MightyAmp® DNA Polymerase Ver.3(TaKaRa, Cat.#R076A)
• 無水乙醇
• 滅菌超純�
• 低吸�EP�PCR�
• PCR熱循�(huán)儀
• Thermo-mixer (Eppendorf)
【注意事項�
A.避免樣品交叉污染
吸取不同樣品時更換槍�
B.酶的取放應在冰上進行,為避免反復凍融或長期使用后活性下�,我們推薦您在首次使用后將剩余試劑小份分裝凍�
【實驗步驟�
起始材料:純化后的基因組DNA,溶�EB��
DNA純度要求�OD260�OD280�1.8�2.0
1)在純化的基因組DNA中加�1ul M�1ul溶液L1�1ul模式序列,充分混�,將其置�Thermo-mixer (Eppendorf)��37°C�850rmp避光反應20h�
2�5fC標記完成后,按照MightyAmp® DNA Polymerase Ver.3(TaKaRa, Cat.#R076A)說明書對特異性的位點進行PCR擴增�
3)按�Oligo Clean & Concentrator (ZYMO, #D4060)說明書純�PCR后的DNA, �30ul 超純水洗�,于-20°C保存�