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歡迎光臨! 當前位置� 首頁 > 詳細�(nèi)�

【產(chǎn)品編號�2793950

【英文名稱�Locus-specific, quantitative 5fC analysis Kit

【中文名稱�特定位點5-醛基胞嘧啶定量檢測試劑盒

【產(chǎn)品內(nèi)容�

�(chǎn)品組�

含量

溶液L1Buffer L1

2.4 mL

M

24

模式序列

24ul

注:溶液L1:丙二腈反應液;M:丙二腈

【保存條件�模式序列置于-20 °C,可保存12個月�

                     M和溶�L1置于4 °C,可保存12個月�

 M需避光保存�

【產(chǎn)品概述�

5-甲基胞嘧啶修飾(5mC)是真核細胞基因組中最為重要的表觀遺傳修飾之一�5mC可以�TET家族酶的作用下逐步氧化生成5-羥甲基胞嘧啶�5hmC��5-醛基胞嘧啶(5fC)和5-羧基胞嘧啶(5caC�;對于上述幾種新�DNA修飾的功能研究是目前核酸表觀遺傳學的一個研究熱��

百靈威推出新�5fC檢測試劑�,它主要用于5-醛基胞嘧啶(5-formylcytosine, 5fC)的全基因組單堿基分辨率測序;也可應用于5fC在生物發(fā)育和疾病�(fā)生發(fā)展過程的生物學功能研��

【自備材料�

Oligo Clean & Concentrator (ZYMO, #D4060)

MightyAmp® DNA Polymerase Ver.3(TaKaRa, Cat.#R076A)

無水乙醇

滅菌超純�

低吸�EP�PCR

PCR熱循�(huán)儀

Thermo-mixer (Eppendorf)

【注意事項�  

A.避免樣品交叉污染

吸取不同樣品時更換槍�

B.酶的取放應在冰上進行,為避免反復凍融或長期使用后活性下�,我們推薦您在首次使用后將剩余試劑小份分裝凍�

【實驗步驟�

起始材料:純化后的基因組DNA,溶�EB��

DNA純度要求�OD260OD2801.82.0

1)在純化的基因組DNA中加�1ul M�1ul溶液L11ul模式序列,充分混�,將其置�Thermo-mixer (Eppendorf)��37°C850rmp避光反應20h�

25fC標記完成后,按照MightyAmp® DNA Polymerase Ver.3(TaKaRa, Cat.#R076A)說明書對特異性的位點進行PCR擴增�

3)按�Oligo Clean & Concentrator (ZYMO, #D4060)說明書純�PCR后的DNA, 30ul 超純水洗�,于-20°C保存�

�1� 總共1�