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技�(shù)、產(chǎn)�、資� --- 2010�12月刊 �1�
技�(shù)資訊

蛋白印跡�(zhuǎn)移膜的選�

蛋白印跡�(zhuǎn)移(Western Blot)實(shí)�(yàn)中常用的�(zhuǎn)移膜主要是硝酸纖維素膜(Nitrocellulose Blotting Membranes,NC)和PVDF�,此外也有用尼龍�、DEAE纖維素膜�

1、硝酸纖維素膜與PVDF膜特�(diǎn)介紹�

1)硝酸纖維素膜(NC膜)是蛋白印跡實(shí)�(yàn)中使用最廣泛的轉(zhuǎn)移介�(zhì),對(duì)蛋白有很�(qiáng)的結(jié)合能�,且適用于各種顯色方�。NC膜使用簡(jiǎn)便,無需甲醛�(yù)處理,只要在無離子水面浸�(rùn)排出膜內(nèi)氣泡,電泳緩沖液中平衡幾分鐘即可。NC膜容易封�,無需特別�(yán)�(jǐn)?shù)那逑礂l�,轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白在合適的條件下可以�(wěn)定保存很�(zhǎng)�(shí)��
NC膜越純,其蛋白結(jié)合能力就越高。但純的NC膜比較脆,容易卷,不適合用于需要多次重�(fù)清洗的實(shí)�(yàn)。另外由于NC膜上�(jié)合的蛋白�(huì)因一些去污劑而被代替,在封閉�(shí)最好使用較溫和的Tween20,濃度不超過0.3%�
2)PVDF�
與硝酸纖維素膜相�,PVDF膜在蛋白�(zhì)截留能力、機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)相容性上都擁有更�(yōu)越的性能。做N端蛋白測(cè)序時(shí),在相當(dāng)“�(yán)�”的清洗條件下,當(dāng)尼龍或硝纖膜已經(jīng)降解的情況下,PVDF膜依然保持本色。PVDF膜不適合熒光,同�(shí)PVDF膜需�100%甲醇�(yù)處理再用緩沖液平衡才能使��

2、膜選擇依據(jù)�

1)膜與目的蛋白分子的�(jié)合能力(單位面積的膜能結(jié)合蛋白的載量)以及膜的孔徑(攔截蛋白的大?。?br /> 2)保證不影響后續(xù)的顯色檢�(cè)(即適用于所選的顯色方法,信噪比要好��
3)如果后繼實(shí)�(yàn)有其他要求,根據(jù)不同目的來挑選不同的�(zhuǎn)移膜�

3、兩種膜的參�(shù)�(duì)比:

參數(shù)�(xiàng)
硝酸纖維素膜�NC)膜
PVDF
材料�(zhì)�
干的NC膜易�
�(jī)械強(qiáng)度高
�(jié)合能�
80-110 ug/cm2
125-200 ug/cm2
背景
溶劑耐受�
操作程序
緩沖液潤(rùn)�,避免氣�
使用�100%甲醇�(rùn)�
檢測(cè)方式
常規(guī)染色,可用放射性和非放射性檢�(cè)
常規(guī)染色,可用考馬斯亮�(lán)染色,可用于ECL檢測(cè)、質(zhì)譜分析和快速免疫檢�(cè)
適用范圍
大于20 KD的大分子蛋白選用0.45 um孔徑膜;小于20 KD選用0.2 um孔徑�;小�7 KD選用0.1 um孔徑�
分為0.45 um�0.2 um孔徑,孔徑小的對(duì)小分子蛋白有較好的攔截吸�。主要用于核酸、糖蛋白及蛋白質(zhì)�(cè)�
�(jià)�
�(jià)格較便宜
較貴
百靈威可提供一系列�(zhì)量極佳的硝酸纖維素膜和PVDF�,歡迎致�400-666-7788垂詢�
�(chǎn)品資�

百靈威推出背景低、信噪比高的NC與PVDF�

化學(xué)與生物密不可�,用化學(xué)的原理和方法研究生命�(xiàn)象,或研究生命的化學(xué)問題,這些均是如今的熱門研究�(lǐng)域。百靈威作為生物�(xué)中的化學(xué)專家,積極地�(lián)合德�(guó)著名的蛋白質(zhì)電泳專家SERVA,為中國(guó)生物�(xué)家提供背景低、信噪比高的NC與PVDF��

�(chǎn)品編�(hào)
�(chǎn)品名�
孔徑
�(guī)�
NC-45-Nitrocellulose Membrane, plain, white
0.45 µm
10sheets
NC-45-Nitrocellulose Membrane, plain, white
0.45 µm
1roll
NC-2-Nitrocellulose Membrane, white
0.2 µm
5sheets
NC-2-Nitrocellulose Membrane, white
0.2 µm
1roll
Fluorobind Membrane, surface PVDF
0.2 µm
1roll
Fluorobind Membrane, surface PVDF
0.2 µm
10sheets
Immobilon(TM)-P-membrane
0.2 µm
1roll
Immobilon(TM)-P-membrane
0.45 µm
1roll

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